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    蝦堿性磷酸酶使用注意事項
    發布時間:2023-05-05   點擊次數:12次

    蝦堿性磷酸酶使用注意事項


    Alkaline Phosphatase,中文名堿性磷酸酶,可將DNA、RNA的5’端磷酸基團去除,常用于阻止載體的自連作用:在分子克隆實驗中,DNA連接酶催化DNA連接時需要有磷酸基團的存在,載體在經酶切后會在切點端保留一個磷酸基團。而載體經堿性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端無磷酸基團,因而不可以和自身3’ 端連接。因此連接反應中載體本身會優先發生的連接反應被阻止,提高了目的片段插入率。另外,堿性磷酸酶還可制備用于5’端標記的DNA模板。


    本品為蝦來源的堿性磷酸酶,可以降解幾乎所有磷酸單酯,但是該酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。該酶作用于末端去磷酸化,無論末端為粘端,還是平端。SAP 也可以用來降解PCR 反應中的dNTP,用于后續測序和SNP分析。


    來源(Source) 來自畢赤酵母,克隆有北極蝦(Pandalus rorealis)的蝦堿性磷酸酶基因 

    質量控制(Quality Control) 無核糖核酸酶、脫氧核糖核酸酶污染 

    純度(Purity) >95% 

    熱滅活(Thermal Inactivation) 65℃溫浴5 min,活性完全不可逆喪失 

    活性定義(Unit definition) 在25℃條件下,30分鐘能使1 μg經HindⅢ(產生5’突出末端)消化的pUC19 DNA去磷酸化所需的酶量定位為1個活力單位。 


    注意事項

    1)1×SAP Buffer: 50mM Bis-Tris HCl (pH 6.0),1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2,25℃溫育。

    2)熱失活:65℃加熱5分鐘,不可逆失活。當完成去磷酸化反應后,無需純化產物,可以直接用于后續連接反應。

    3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

    4) 本產品僅作科研用途!


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